关于TurboID邻近标记技术的常见问题与解答

TurboID邻近标记技术是一种高通量的蛋白质相互作用检测方法，近年来在学术研究和生物技术领域得到了广泛应用。然而，对于初学者和研究人员来说，可能存在一些常见的问题，这里将对一些常见的问题进行解答。

1、TurboID邻近标记技术和传统的邻近标记技术有什么区别？

传统的邻近标记技术通常利用生物活性相似的化合物对蛋白质进行标记，难以控制探针的细胞内分布，同时具有慢速和低效的问题。而TurboID邻近标记技术是在原有的Proximity Labeling技术的基础上进行改进的，它利用酵母酶ApeX2的高催化效率，将生物素（biotin）与靠近的蛋白质共价结合，从而实现对蛋白质的标记。相比于原有的Proximity Labeling技术，TurboID具有更高的灵敏度和更低的背景噪音，同时也能够更加准确地鉴定蛋白质的互作情况，解析目的蛋白互作网络。

2、与其他高通量蛋白质相互作用检测技术相比，TurboID邻近标记技术的优势在哪里？

TurboID邻近标记技术具有高速、高灵敏度、高特异性和高通量等优势。对于鉴定互作蛋白而言，TurboID邻近标记技术可以捕获瞬时的或较弱的蛋白相互作用；适用于低丰度的蛋白或疏水性较强的膜蛋白的互作；在目标生物体内获得的互作情况可信度高，假阳性低；可以在最佳的生理状态下获得的靶标蛋白的信息；可以在细胞或动物体内进行蛋白质相互作用检测，具有较强的实用性和应用前景。

3、TurboID邻近标记技术适用的对象？

目前，本公司将TurboID邻近标记技术运用的成熟体系有：植物体（例如：本氏烟、拟南芥）以及部分动物体，详情请咨询客服。

4、TurboID邻近标记技术获取的互作蛋白假阳性率如何？如何设计合适的阴性对照实验？

由于TurboID邻近标记技术是利用酵母酶ApeX2的高催化效率将生物素（biotin）与靠近的蛋白质共价结合而获取的互作蛋白，并且是在目标生物体内以及最佳的生理状态下获得的，所以它的假阳性低。

在实际实验当中，我们为了减少假阳性结果，消除载体、生物素（biotin）以及TurboID对实验结果的影响，在进行TurboID邻近标记技术实验时会设计阴性对照实验。阴性对照实验使用表达TurboID空载体的细胞或者组织。

5、TurboID邻近标记技术获取的互作蛋白数据如何反馈？

我们会向客户提供TurboID邻近标记技术实验过程中产生的一切数据（包括Western blot验证结果，细胞转化结果，质谱鉴定的原始数据等等）；根据客户的蛋白数据结果，制作并提供蛋白质互作网络模式图。