蛋白质免疫印迹（Western Blot）

▲ Western Blot原理示意图

  Western Blot是一种用于分离和鉴定蛋白质的技术。它利用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) 来分离指定样品中包含的各种蛋白质，然后将分离的蛋白质转移到硝酸纤维素或 PVDF 膜上，再将膜与对应目标蛋白质的特异抗体一起孵育。在洗膜过程中，未结合的抗体被洗掉，只留下与目标蛋白质结合的抗体，最后通过显影胶片或荧光扫描来检测结合的抗体。由于抗体仅与目标蛋白质结合，因此看到的带一般就是目的条带，条带的粗细对应于蛋白质量。通过分析特定反应的位置和强度，可以获得目标蛋白在给定细胞或组织匀浆中的表达信息。
  由于凝胶电泳的高分辨率和免疫的强特异性和高灵敏度，Western印迹分析可检测低至1ng的靶蛋白。该方法广泛应用于分子生物学、生物化学、免疫遗传学等分子生物学领域。

　　①细胞或者组织总蛋白提取；
　　②蛋白质定量；
　　③SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳；
　　④蛋白质转膜（硝酸纤维素或 PVDF）；
　　⑤膜的封闭；
　　⑥一抗、二抗孵育；
　　⑦显影检测；
　　⑧数据分析，交付结果。

　　①提供的细胞或者组织样品尽可能新鲜，组织块大于100 mg；细胞大于6×106；
　　②说明样品上样顺序信息；
　　③客户需要自备一抗，或者由本公司代购一抗；
　　④收到样品后7~10个工作日内向客户交付实验数据；

　　①团队经验丰富；
　　②交付周期短，提供原始图片以及试验记录，保证数据真实可靠；
　　③本公司所用的电泳设备、一抗、二抗、显影液和显影仪都是进口的，确保实验的高灵敏度以及高特异性；
　　④可以检测pg级别的低浓度蛋白。