蛋白互作：GST下拉实验（GST-pull down assay）

▲ GST下拉实验（GST-pull down）技术原理示意图

  GST-pull down 技术是一种在体外验证蛋白质相互作用的试验技术，可用来进一步验证酵母双杂交的结果。将靶蛋白与 GST（谷胱苷肽巯基转移酶, Glutathione-Stransferase）融合，使其与谷胱甘肽亲和树脂结合，然后在目的蛋白溶液过柱时，便可从中捕获与靶蛋白相互作用的目的蛋白，洗脱结合物后通过western blot分析，即可证实两种蛋白间的相互作用或筛选与之互作的蛋白。

  ①构建表达载体：目的基因克隆或目的基因合成；限制性内切酶酶切骨架载体并纯化；目的基因插入骨架载体；转化大肠杆菌，筛选阳性克隆并测序鉴定；
  ②转化表达菌株：将目的表达载体转化表达菌株；
  ③制备目的蛋白：诱导目的蛋白表达并提取目的蛋白；
  ④GST-pull down实验；
  ⑤Western Blot检测目的蛋白；
  ⑥拍照记录实验结果。

▲ GST-pull down实验流程图

  GST下拉实验技术服务范畴：验证两个已知蛋白质间的相互作用
  技术服务优势：
  ①团队经验丰富；
  ②交付周期短，提供原始图片，保证数据真实可靠。